脂肪測定儀采用索氏提取法的原理進行實驗,此方法適用于脂類含量較高,結合態的脂類含量較少,能烘干磨細,不宜吸濕結塊的樣品的測定。此法只能測定游離態脂肪,而結合態脂肪無法測出,要想測出結合態脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態的脂肪方能測出。
另外此法是經典方法,對大多數樣品結果比較可靠,但需要周期長,溶劑量大。
樣品經前處理后,放入圓筒濾紙內,將濾紙筒置于脂肪測定儀提取管中,在水浴中加熱回流,使樣品中的脂肪進入溶劑中,回收溶劑后所得到的殘留物,即為脂肪(粗脂肪)采用這種方法測出游離態脂,此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發油、糖脂等物質,所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。
1、濾紙筒的制備
將濾紙剪成長方形8×375px ,卷成圓筒,直徑為150px,將圓筒底部封好,放一些脫脂棉,避免向外漏樣。
2、稱取樣品
將樣品烘干磨細,稱取一定量與紙筒封好上口,用測定水的樣品。
3、脂肪測定儀的準備
脂肪測定儀由三部分組成,回流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘干并稱至恒重。其它要干燥。
4、抽提
將裝好樣的紙筒放入抽提管 , 倒入乙氧基乙烷,乙氧基乙烷的量從提取管加入,加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置,在恒溫水浴中抽提,水浴溫度大約為55℃左右,可用濾紙檢驗,理論值抽提6-8小時,實際值3-4小時,但也根據樣品性質來決定。
5、回收乙氧基乙烷
當乙氧基乙烷在提取管內即將虹吸時立即取下提取管,將其下口放到乙氧基乙烷回收瓶內,使之傾斜,然后將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。
6、計算
脂肪%= (W2-W1)/W x 100
W2——瓶和樣品重(g)
W1——瓶子重量(g)
W——樣品重量(g)
或:脂肪%=(抽提后濾紙與樣品重量—抽提前濾紙重量)/樣品重量 × 100
濾紙筒應事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。